叶绿素是植物光合作用的重要光合色素,常见的有叶绿素a、b、c、d四种类型,其中叶绿素a是一种能将光合作用的光能传递给化学反应系统的唯一色素,叶绿素b、c、d等吸收的光能均是通过叶绿素a传递给化学反应系统的。通过测定叶绿素a,可掌握水体的初级生产力,了解河流、湖泊和海洋中浮游植物的现存量。试验表明,当叶绿素a质量浓度升至10 mg/m3以上并有迅速增加的趋势时,就可以预测水体即将发生富营养化。因此,可将叶绿素a含量作为评价水体富营养化并预测其发展趋势的指标之一。
叶绿素a的测定方法有高效液相色谱法、分光光度法和荧光光谱法。高效液相色谱法精确度高,但操作步骤烦琐。目前最常用的是分光光度法和荧光光谱法。
分光光度法是常规的分析法,仪器设备简单,灵敏度高,但是操作繁琐,分析耗时长。此方法还需要对样品进行复杂的前处理过程,很难满足水体藻类实时监测要求。
现场叶绿素a检测方法建议使用荧光法,荧光法测定叶绿素a应用广泛,该方法测定快速、操作简单,无须任何试剂。
方法原理:当丙酮提取液用436 nm的紫外线照射时,叶绿素a可发射670 nm的荧光,在一定浓度范围内,发射荧光的强度与其浓度成正比,因此,可通过测定样品丙酮提取液在436 nm紫外线照射时产生的荧光强度,定量测定叶绿素a的含量。
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